2024-12-05 03:06:23
營(yíng)養(yǎng)瓊脂方瓶(羅氏瓶)通常是指營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基的一種包裝形式,適合實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行微生物培養(yǎng)使用。營(yíng)養(yǎng)瓊脂是一種基礎(chǔ)培養(yǎng)基,用于非苛養(yǎng)微生物的培養(yǎng),以及在生化或血清學(xué)測(cè)試前的質(zhì)量控制和純度檢查。以下是營(yíng)養(yǎng)瓊脂的典型配方:1.**成分**:-蛋白胨:10.0g/L-牛肉膏粉:3.0g/L-氯化鈉:5.0g/L-瓊脂:15.0g/L-終pH值:7.3±0.2(25℃)2.**配制方法**:-稱取33g營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基粉末,加入1000mL蒸餾水或去離子水。-攪拌加熱煮沸至完全溶解。-分裝到方瓶(羅氏瓶)中,通常分裝量為100mL或500mL。-121℃高壓滅菌15分鐘。3.**使用方法**:-滅菌完成后,取出方瓶并冷卻至大約40-45°C。-如果需要富集,可在滅菌后加入血液或其他生物液體。-在無菌條件下,將培養(yǎng)基倒入無菌的培養(yǎng)皿中或作為液體培養(yǎng)基使用。-培養(yǎng)基凝固后,可將培養(yǎng)皿放置在熱空氣烤箱中,用較低溫度烘烤幾分鐘,以去除使用前培養(yǎng)皿上的任何水分。4.**儲(chǔ)存方法**:-粉末形式的培養(yǎng)基應(yīng)儲(chǔ)存在10至30°C之間,容器需緊密封閉。-制備好的培養(yǎng)基應(yīng)在20-30°C的環(huán)境中儲(chǔ)存。長(zhǎng)雙歧桿菌和嬰兒雙歧桿菌在PYG培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)情況通常表現(xiàn)為圓形凸起,奶油色,邊緣整齊光滑的菌落 。亞利桑那菌瓊脂預(yù)裝培養(yǎng)皿
肉浸液肉湯是一種基礎(chǔ)的微生物培養(yǎng)基,其主要特點(diǎn)和制作方法如下:1.**成分**:肉浸液肉湯主要由絞碎牛肉、氯化鈉、蛋白胨和磷酸氫二鉀組成,再加上一定量的蒸餾水。具體配比為:絞碎牛肉500g、氯化鈉5g、蛋白胨10g、磷酸氫二鉀2g、蒸餾水1000mL。2.**制作方法**:首先將絞碎的去筋膜無油脂牛肉與蒸餾水混合后放冰箱過夜,除去液面之浮油,隔水煮沸半小時(shí),使肉渣完全凝結(jié)成塊,用絨布過濾,并擠壓收集全部濾液,加水補(bǔ)足原量。然后加入蛋白胨、氯化鈉和磷酸鹽,溶解后校正pH至7.4~7.6,煮沸并過濾,分裝燒瓶,121℃高壓滅菌30分鐘。3.**用途**:肉浸液肉湯通常用于培養(yǎng)那些營(yíng)養(yǎng)要求不是特別高的細(xì)菌,如溶血性鏈球菌及其他營(yíng)養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的增菌培養(yǎng)(GB/T4789.28-2003中4.1G)。它提供了細(xì)菌生長(zhǎng)所需的氮源、維生素和生長(zhǎng)因子。4.**培養(yǎng)特征**:在肉浸液肉湯中,細(xì)菌可以很好地生長(zhǎng),通常表現(xiàn)為肉湯混濁,這是由于細(xì)菌的代謝活動(dòng)導(dǎo)致的。5.**儲(chǔ)存**:肉浸液肉湯的脫水培養(yǎng)基應(yīng)避光儲(chǔ)存于25℃下陰涼干燥處,開過封的脫水培養(yǎng)基應(yīng)蓋緊瓶蓋注意密封儲(chǔ)存。AN厭氧瓊脂平板不同細(xì)菌在TSFA上的生長(zhǎng)特征不同,如金黃色葡萄球菌可產(chǎn)生黃色的色素,大腸埃希氏菌形成無色透明大菌落。
疊氮鈉血瓊脂基礎(chǔ)(AzideBloodAgarBase)是一種選擇性培養(yǎng)基,主要用于從糞便、污水和其他樣本中分離和檢測(cè)鏈球菌和葡萄球菌。以下是它的一些特點(diǎn)和配制方法:**特點(diǎn)**:1.**成分**:含有胰蛋白胨、肉浸粉、氯化鈉、疊氮鈉和瓊脂等成分,其中疊氮鈉作為選擇性抑制劑,對(duì)大多數(shù)革蘭氏陰性菌具有抑制作用,但允許某些革蘭氏陽性菌如鏈球菌和葡萄球菌的生長(zhǎng)。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值控制在7.2±0.2(25℃),為細(xì)菌提供適宜的生長(zhǎng)環(huán)境。3.**應(yīng)用**:除了用于分離培養(yǎng)鏈球菌和葡萄球菌,疊氮鈉血瓊脂基礎(chǔ)還可用于測(cè)定溶血反應(yīng)。4.**溶血反應(yīng)**:在該培養(yǎng)基上,可以觀察到α溶血(培養(yǎng)基變綠)、β溶血(菌落周圍培養(yǎng)基變透明)和γ溶血(培養(yǎng)基無變化)。**配制方法**:1.稱取33.2g培養(yǎng)基粉末,加入1000mL蒸餾水或去離子水中。2.加熱煮沸至完全溶解。3.121℃高壓滅菌15分鐘。4.冷卻至50℃左右,加入50mL無菌羊血,混勻后倒入無菌培養(yǎng)皿中。**注意事項(xiàng)**:-避免攝入、吸入、皮膚接觸疊氮鈉,配制時(shí)應(yīng)在通風(fēng)櫥中進(jìn)行,并佩戴適當(dāng)?shù)膫€(gè)人防護(hù)裝備。-培養(yǎng)基中含有的疊氮鈉具有**,應(yīng)妥善處理和保存。
DTA培養(yǎng)基的pH值對(duì)微生物生長(zhǎng)有影響。pH值是描述溶液酸堿性的基本指標(biāo),對(duì)微生物的生長(zhǎng)和繁殖有深遠(yuǎn)的影響。微生物的適應(yīng)pH范圍各不相同,不同種類的微生物對(duì)pH值的敏感度不同,存在一定的平衡范圍。pH值的過高或過低都可能對(duì)微生物的生長(zhǎng)造成不利影響。在DTA培養(yǎng)基中,pH值被控制在6.7±0.1(25℃),這個(gè)pH值范圍是為嗜熱菌芽孢的分離培養(yǎng)而優(yōu)化的。在這個(gè)pH值下,胰酪蛋白胨能夠提供適宜的碳氮源和生長(zhǎng)因子,而葡萄糖作為可發(fā)酵的糖,溴甲酚紫作為酸堿指示劑,瓊脂作為凝固劑,共同為嗜熱菌芽孢提供適宜的生長(zhǎng)環(huán)境。當(dāng)培養(yǎng)基的pH值偏離這個(gè)范圍時(shí),可能會(huì)影響微生物的新陳代謝和酶活性,改變細(xì)胞膜的通透性,影響微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收和代謝產(chǎn)物的排泄,進(jìn)而影響微生物的生長(zhǎng)。例如,如果pH值過低,可能會(huì)抑制菌體中某些酶的活性,阻礙新陳代謝;如果pH值過高,可能會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞膜通透性改變,影響營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收。因此,在配制和使用DTA培養(yǎng)基時(shí),嚴(yán)格控制pH值是非常重要的,以確保微生物能夠在適宜的環(huán)境中生長(zhǎng)。由于雙歧桿菌是厭氧菌,PYG培養(yǎng)基需要在厭氧或微需氧條件下使用,以確保細(xì)菌的正常生長(zhǎng) 。
輕唾瓊脂培養(yǎng)基(MSA)基礎(chǔ),也稱為輕型唾液鏈球菌瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ),是一種用于分離培養(yǎng)輕型鏈球菌(綠色鏈球菌)、唾液鏈球菌(非溶血性鏈球菌)和腸球菌的選擇性培養(yǎng)基。以下是它的一些特點(diǎn):1.**成分**:該培養(yǎng)基的配方中含有胰酪蛋白胨、牛肉粉、磷酸氫二鉀、葡萄糖、蔗糖、臺(tái)盼藍(lán)、結(jié)晶紫和瓊脂等。其中,胰酪蛋白胨和牛肉粉提供氮源和碳源,蔗糖作為可發(fā)酵的碳水化合物來源,磷酸氫二鉀作為緩沖劑,臺(tái)盼藍(lán)和結(jié)晶紫作為染料提供菌落顏色,瓊脂作為凝固劑。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值通??刂圃?.0±0.2(25℃),為細(xì)菌提供適宜的生長(zhǎng)環(huán)境。3.**選擇性**:通過添加結(jié)晶紫和亞碲酸鉀,該培養(yǎng)基可以抑制大多數(shù)革蘭氏陰性桿菌和大多數(shù)革蘭氏陽性細(xì)菌的生長(zhǎng),而對(duì)鏈球菌和腸球菌的生長(zhǎng)影響較小。4.**應(yīng)用**:輕唾瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ)主要用于輕型鏈球菌、唾液鏈球菌和腸球菌的分離培養(yǎng),這些細(xì)菌在培養(yǎng)基上可以形成具有特征顏色的菌落,有助于后續(xù)的鑒定和分析。5.**配制方法**:通常稱取90g培養(yǎng)基粉末,加入1000mL蒸餾水或去離子水中,加熱煮沸至完全溶解,分裝后進(jìn)行高壓滅菌。滅菌結(jié)束后,冷卻至50-55℃,加入無菌1%亞碲酸鉀溶液,混勻后倒入無菌培養(yǎng)皿中。不同的微生物對(duì)培養(yǎng)基的要求差異較大,因此在選擇水瓊脂培養(yǎng)基時(shí)需要考慮具體的研究目的和微生物的特性。YPD預(yù)裝培養(yǎng)基平板
巴氏芽孢桿菌的芽孢形成需要特定的培養(yǎng)條件,包括營(yíng)養(yǎng)和環(huán)境因素。例如,使用改良的Schaeffer培養(yǎng)基。亞利桑那菌瓊脂預(yù)裝培養(yǎng)皿
嗜鹽菌選擇性瓊脂是一種專門用于分離和培養(yǎng)嗜鹽菌的培養(yǎng)基,其特點(diǎn)和應(yīng)用如下:1.**成分**:-蛋白胨:20.0g/L-氯化鈉:40.0g/L-結(jié)晶紫:0.0005g/L-瓊脂:17.0g/L-pH值:8.7±0.1(25℃)2.**檢驗(yàn)原理**:-蛋白胨提供氮源和碳源,支持微生物生長(zhǎng)。-高含量的氯化鈉創(chuàng)造高滲環(huán)境,有利于嗜鹽菌的生長(zhǎng),同時(shí)抑制不耐高鹽的細(xì)菌。-結(jié)晶紫抑制革蘭氏陽性菌的生長(zhǎng)。-瓊脂作為凝固劑,使培養(yǎng)基凝固成固體。-高pH值有助于抑制部分雜菌的生長(zhǎng)。3.**配制方法**:-稱取77.0g培養(yǎng)基粉末,加熱攪拌溶解于1000mL蒸餾水中。-分裝后,121℃高壓滅菌15分鐘,備用。4.**使用方法**:-將培養(yǎng)基傾注成平板,待凝固后使用。-接種樣品后,放置于36±1℃恒溫培養(yǎng)箱中需氧培養(yǎng)18-24小時(shí)。5.**細(xì)菌生長(zhǎng)特征**:-副溶血性弧菌ATCC17802:無色菌落,較濕潤(rùn)。-溶藻弧菌ATCC17749:無色菌落。-金黃色葡萄球菌ATCC25923:抑制生長(zhǎng)。6.**微生物靈敏度試驗(yàn)**:-按標(biāo)簽用法制備培養(yǎng)基,接種質(zhì)控菌株,放置于36±1℃需氧培養(yǎng)18-24小時(shí)。-回收率計(jì)算時(shí),用TSA瓊脂做對(duì)照培養(yǎng)基。亞利桑那菌瓊脂預(yù)裝培養(yǎng)皿