2025-01-09 03:06:48
芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA產(chǎn)品每個(gè)生物實(shí)驗(yàn)室都用得起的單分子免疫檢測我們的方法利用了亞飛克爾反應(yīng)室陣列(圖1C)我們稱之為單分子陣列(SiMoA)——可以分離和檢測單個(gè)酶分子20-24。這種方法借鑒了Walt等人20-23的工作陣列用于研究單個(gè)酶的動(dòng)力學(xué)和抑制作用。我們的目標(biāo)是利用捕獲和檢測單個(gè)酶的能力來檢測用酶標(biāo)記的單個(gè)蛋白質(zhì)分子。在這個(gè)單分子免疫測定的**步(圖1A),在微球(直徑μm)上形成一個(gè)三明治抗體復(fù)合物,結(jié)合的復(fù)合物用酶標(biāo)記,如同常規(guī)的基于微球的ELISA。當(dāng)測定含有極低濃度蛋白質(zhì)的樣品,蛋白質(zhì)的比值分子(以及由此產(chǎn)生的酶標(biāo)記復(fù)合物)與微球的比例很小(通常小于1:1),因此含有標(biāo)記免疫復(fù)合物的微球百分比遵循泊松分布,導(dǎo)致單個(gè)微球上存在單一免疫復(fù)合物。例如,如果在(3000個(gè)分子)的蛋白質(zhì)中捕獲并標(biāo)記了50μM的蛋白質(zhì),并且在200,000個(gè)微球上進(jìn)行標(biāo)記,則珠子,然后,。無法檢測到這些低數(shù)量的酶使用標(biāo)準(zhǔn)檢測技術(shù)(例如,平板閱讀器)的標(biāo)簽,因?yàn)闊晒馊玖嫌擅糠N酶生成的產(chǎn)物擴(kuò)散到一個(gè)大卵試驗(yàn)體積(通常為),并進(jìn)入其中需要數(shù)十萬種酶標(biāo)簽才能產(chǎn)生高于該水平的熒光信號背景。 5)數(shù)字化高敏ELISA芯片試劑盒,微量樣本可同時(shí)測2-4個(gè)指標(biāo);科研場景用數(shù)字ELISA微量樣本
芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA產(chǎn)品
每個(gè)生物實(shí)驗(yàn)室都用得起的單分子免疫檢測
人類形式的蛋白質(zhì)被加入到25%牛血清中以代替臨床測試樣本;通常使用四倍稀釋因子以減少免疫測定中的基質(zhì)效應(yīng)4。使用數(shù)字ELISA檢測25%血清中的PSA,從該實(shí)驗(yàn)中確定了LOD為~50aM(1.5fg/mL),相當(dāng)于整個(gè)血清中的LOD為~200aM(6fg/mL)。檢測到的比較低濃度為250aM,相當(dāng)于25%血清中的1fMin全血清。由于LOD是通過外推背景濃度來確定的加上背景的三個(gè)標(biāo)準(zhǔn)差,不同運(yùn)行的LOD取決于背景的CV。在具有典型背景方差的幾個(gè)實(shí)驗(yàn)中,全血清PSA的亞飛摩爾LOD得以保持。相比之下,一種前列的商業(yè)PSA檢測方法(ADVIACentaur,西門子)報(bào)告在人血清中的LOD為3pM(0.1ng/mL),并且已經(jīng)報(bào)道了LOD在10-30fM17,26。 科研用數(shù)字ELISA靈活芯棄疾JX-8B單分子ELISA檢測產(chǎn)品,少至可以進(jìn)行8孔、4孔的靈活檢測。
創(chuàng)新性的解決方案:芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA
我公司推出的數(shù)字化高靈敏ELISA芯片檢測產(chǎn)品應(yīng)用場景:適合生物實(shí)驗(yàn)室、醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室、科研市場、產(chǎn)品預(yù)研、產(chǎn)品開發(fā)、ELISA檢測、動(dòng)物病情檢測等各種應(yīng)用場景應(yīng)用范圍:各種高靈敏多重免疫檢測,可替代各種ELISA試劑盒,及其他免疫檢測產(chǎn)品。
用DNA捕獲探針(5‘-NH2/C12-GTTGTCAAGATGCTA)功能化的微球CCGTTCAGAG-3‘)是按照制造商的說明制備的。這些珠子與生物素化互補(bǔ)DNA的1μM(5’-生物素-CTCT)孵育。在含有0.5MNaCl和0.01%Tween-20的TE緩沖液中過夜(16h)孵育GAACGGTAGCATCTTGACAAC-3‘。孵育后,用PBS洗滌珠子三次含0.1%Tween-20的緩沖液。將珠子樣品分裝至微孔板中100μL中每孔給予400,000個(gè)微球。從微孔板孔中吸取緩沖液,將微球重懸后與不同濃度的ofSβG孵育。
芯棄疾JX-8B數(shù)字化高靈敏ELISA芯片檢測產(chǎn)品;應(yīng)用范圍:各種高靈敏多重免疫檢測,可替代各種ELISA試劑盒,及其他免疫檢測產(chǎn)品。
參考原理:通過量化異常水平的生物標(biāo)志物來檢測新生疾病過程是診斷和治干預(yù)的關(guān)鍵,以在出現(xiàn)繼發(fā)性臨床癥狀之前進(jìn)行干預(yù)。蛋白質(zhì)和核酸生物標(biāo)志物的發(fā)現(xiàn)和驗(yàn)證已成為生物制藥研究、靶向臨床研究設(shè)計(jì)以及早期疾病診斷追求的主要驅(qū)動(dòng)力。1–4由于蛋白質(zhì)生物標(biāo)志物提供了比核酸更多的下游信息內(nèi)容,因此它們可能作為臨床決策工具具有比較大的潛力。5據(jù)估計(jì),人類蛋白質(zhì)組來源于超過20,000個(gè)基因,且循環(huán)中有超過4000種分泌蛋白。6,7這些分泌蛋白中不到十分之一(375種)可以通過蛋白質(zhì)測定技術(shù)可靠地測量。6在這些可測量的蛋白質(zhì)中,幾乎有一半(171種)已由美國食品藥品監(jiān)督管理局(FDA)批準(zhǔn)的診斷測試,8個(gè)指出了蛋白質(zhì)生物標(biāo)志物對人類健康的重要性。芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA,每個(gè)實(shí)驗(yàn)室都能用的單分子檢測;
創(chuàng)新性的解決方案:芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA
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將200,000個(gè)功能化DNA捕獲探針與100μL孵育含有目標(biāo)DNA的溶液(5‘-TTGACGGCGAAGACCTGGATGTATTGCTCCTCTGAACGGTAGCATCTTGACAAC-3‘孵育2小時(shí)后,移除DNA靶標(biāo)溶液,用0.2×SSC緩沖液洗滌珠子三次含有0.1%Tween-20的微球重新懸浮并與10nM混合生物素標(biāo)記的信號探針(5‘-TACATCCAGGTCTTCGCCGTCAA/生物素/-3’)對目標(biāo)DNA具有特異性,孵育1小時(shí)。然后將珠子在去除信號探針后用含0.1%吐溫-20的0.2×SSC緩沖液洗滌三次。隨后向珠子沉淀中加入10pMS阝G溶液,混勻并混合1小時(shí)。然后將珠子分離并在含0.1%吐溫-20的5×PBS緩沖液中洗滌六次。重懸于10μLofPBS中并加載到飛升微升孔陣列上。 芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA,微量檢測,使用10uL樣本就能測試;亞皮克級數(shù)字ELISA優(yōu)勢
芯棄疾JX-8B單分子小型化ELISA檢測產(chǎn)品,微量多重檢測,微量樣本就能同時(shí)測試4項(xiàng)指標(biāo);科研場景用數(shù)字ELISA微量樣本
芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA高敏檢測產(chǎn)品;將傳統(tǒng)的模擬信號轉(zhuǎn)化為新型的數(shù)字化信號;創(chuàng)新型原理,有效提高檢測靈敏度,可達(dá)fg/aM級!
陣列芯片原理:從15?Lof基質(zhì)中的500,000個(gè)珠子開始。結(jié)果表明,陣列圖像的定量分析大約一半的孔在珠子沉降幾分鐘后被占據(jù)。對于SimoaHD-1分析儀,沉降時(shí)間減少到90秒,分布在三個(gè)儀器處理周期之間。隨著珠子重新沉降到陣列中,儀器對其他操作(密封和成像)進(jìn)行索引,這些操作已經(jīng)加載到陣列上。通常,會(huì)檢測25,000-50,000個(gè)珠子。由于Simoa中的測量單位(AEB)是一個(gè)比率,一定珠裝載量的差異不影響數(shù)據(jù)質(zhì)量或在大多的范圍內(nèi)保持精度,前提是存在足夠的珠子數(shù)量以保持在泊松噪聲水平之上。22數(shù)據(jù)質(zhì)量會(huì)受到影響,當(dāng)泊松噪聲主導(dǎo)測量誤差時(shí)。這發(fā)生在與背景相關(guān)的正井?dāng)?shù)量降至約50個(gè)珠子以下時(shí),此時(shí)泊松噪聲明顯影響測量的變異系數(shù)(CV)。
科研場景用數(shù)字ELISA微量樣本