2024-12-04 02:06:38
M-MLVUltraReverseTranscriptase(200U/μL)是一種高效的逆轉錄酶,它基于MoloneyMurineLeukemiaVirus(M-MLV)逆轉錄酶進行基因工程改造,以提高其熱穩(wěn)定性和合成效率。以下是該產(chǎn)品的一些關鍵特點和應用:1.**高濃度**:提供200U/μL的高濃度,便于進行各種規(guī)模的實驗。2.**熱穩(wěn)定性**:該酶具有較高的熱穩(wěn)定性,可以在高達55°C的溫度下進行逆轉錄反應,有助于打開RNA的二級結構,提高長鏈cDNA的合成效率。3.**低RNaseH活性**:與野生型M-MLV逆轉錄酶相比,這種酶的RNaseH活性較低,有助于保護RNA模板不被降解,從而提高長鏈cDNA的合成。4.**合成長鏈cDNA的能力**:能夠合成長達5kb甚至更長的cDNA,適合于需要合成全長或長片段cDNA的實驗。5.**適用于多種RNA模板**:可以用于從總RNA或mRNA模板合成cDNA鏈,適用于實時熒光定量RT-PCR、3'-和5'-RACE等實驗。6.**儲存條件**:建議在-20°C下保存,以保持酶的活性和穩(wěn)定性。7.**使用方便**:通常,該酶會與5XFirst-StrandBuffer、0.1MDTT等組分一起提供,方便用戶進行逆轉錄反應。8.**產(chǎn)品規(guī)格**:提供不同規(guī)格的產(chǎn)品,以滿足不同實驗規(guī)模的需求。9.**應用廣**:適用于科研、分子診斷、基因表達分析等領域。
人胎盤RNases抑制劑在分子生物學實驗中有多種應用,主要包括:1.**保護RNA不被降解**:在cDNA合成、體外轉錄、體外翻譯以及mRNA-protein復合物分離純化等過程中,RNaseInhibitor可以保護RNA不被RNases降解。2.**特定RNase活性的鑒定**:RNaseInhibitor也可用于實驗中鑒定特定的RNase活性。3.**與多種酶的兼容性**:它與多種DNA聚合酶、反轉錄酶和RNA聚合酶兼容,如TaqDNA聚合酶、AMV或M-MuLV反轉錄酶等,不會抑制這些聚合酶的活性。4.**pH穩(wěn)定性**:在pH5-8范圍內保持RNA酶抑制活性,在pH7-8時抑制活性高。5.**高親和力結合**:RNaseInhibitor能夠以1:1的比例與RNase通過非共價鍵結合,具有非常高的親和力,其結合常數(shù)大于10^14^。6.**抗氧化能力**:對于升級版的人胎盤RNases抑制劑(RNaseInhibitorPlus,HumanPlacenta),它通過基因工程突變改造獲得,不含對氧化環(huán)境敏感的半胱氨酸,因此具備更高的抗氧化能力。7.**His-tag純化**:產(chǎn)品N端帶有His-tag,可以通過相應的His抗體檢測或通過磁珠、鎳柱吸附去除,方便實驗中對RNaseInhibitor的檢測和去除。這些應用使得人胎盤RNases抑制劑成為分子生物學實驗中保護RNA和研究RNA酶活性的重要工具。遼寧畢赤酵母表達病毒樣顆粒技術服務臨床前研究類人膠原蛋白(HLC)開始被用作涂層來修飾組織工程支架,后來加入交聯(lián)劑增加其機械強度后用作支架。
AdvanceFast1stStrandcDNASynthesisKit(RNaseH-)Plus的RNAseH-功能指的是該試劑盒使用的逆轉錄酶缺乏RNaseH活性。RNaseH是一種酶,它能夠特異性地水解DNA-RNA雜合鏈中的RNA部分,而不作用于單鏈或雙鏈的DNA和RNA。在逆轉錄反應中,RNaseH活性的存在有助于控制RNA:cDNA的比例,從而在擴增效率一致的情況下,能夠更真實地反映原始mRNA中的基因豐度或表達量信息。然而,對于某些應用,如合成長鏈cDNA,RNaseH活性可能不利,因為它可能會在全長cDNA合成完成之前降解RNA模板。因此,RNaseH-的逆轉錄酶可以用于合成多拷貝的cDNA,但可能會導致模板基因表達量的失真。AdvanceFast1stStrandcDNASynthesisKit(RNaseH-)Plus通過使用RNaseH-的逆轉錄酶,有助于提高長鏈cDNA的合成效率,尤其是在合成超過6kb的cDNA時。此外,該試劑盒還提供了gDNADigesterMix,用于去除RNA模板中殘留的基因組DNA污染,保證后續(xù)實驗結果的可靠性。它還提供了RandomPrimersN6和Oligo(dT)18兩種cDNA合成引物,用戶可以根據(jù)需要選擇使用,以滿足不同的實驗需求。合成的單鏈cDNA產(chǎn)物可以直接用于后續(xù)的PCR或qPCR反應。
熱敏感性雙鏈脫氧核糖核酸酶(ThermolabiledsDNase)的活性定義通常是指在特定的反應條件下,酶能夠催化底物轉化的速率。具體來說,一個活性單位(U)定義為在標準反應條件下,每分鐘導致OD260增加0.001(約每分鐘消化1pmol核酸底物)所需的酶量。也就是說,如果酶在25°C下,使用過量的高分子量DNA作為底物,在pH5.0的條件下,每分鐘在260nm處導致吸光度增加0.001,則該酶的活性定義為1個單位(U)。這種酶的特點是能夠在溫和的溫度下(例如37°C)高效地消化雙鏈DNA,同時對單鏈DNA和RNA沒有活性。此外,它具有熱敏感性,即在55°C下加熱5分鐘可以被完全且不可逆地滅活,這一特性使得它在去除RNA樣品中的基因組DNA污染后,可以很容易地被失活,避免對后續(xù)實驗的干擾。使用如高效液相色譜(HPLC)、毛細管電泳(CE-SDS)、質譜等技術,評估蛋白的純度和均一性。
Poly(A)PolymeraseTailingKit是一種用于在體外轉錄的RNA分子3'末端添加Poly(A)尾的試劑盒。以下是其主要特點和應用:1.**聚腺苷酸化**:該試劑盒使用大腸桿菌多聚腺苷酸聚合酶I對體外轉錄RNA的3'端進行聚腺苷酸化。聚腺苷酸化在穩(wěn)定真核生物中的RNA方面起著重要作用,并可提高翻譯起始效率。2.**提高翻譯效率**:Poly(A)尾的添加可以提高體外合成的帽狀RNA在顯微注射和轉染實驗中的翻譯效率。3.**可調節(jié)尾長**:通過調節(jié)反應條件可以控制Poly(A)尾的長度,從而滿足不同的實驗需求。4.**優(yōu)化的反應條件**:試劑盒中的反應條件已經(jīng)過優(yōu)化,適用于使用mMESSAGEmMACHINE?試劑盒合成的RNA轉錄物。5.**提高mRNA穩(wěn)定性**:Poly(A)尾的添加可以提高mRNA在真核細胞中的穩(wěn)定性,從而增強其在轉染或顯微注射后的翻譯效率。6.**提供通用引物結合位點**:Poly(A)尾的添加為合成cDNA時提供通用的引物結合位點,或用于RNA的末端標記或mRNA的定量。7.**適用于多種RNA類型**:該試劑盒適用于體外轉錄的RNA分子,包括長度至少為150個核苷酸的RNA分子。8.**無核酸酶和RNase殘留**:試劑盒中的Poly(A)Polymerase經(jīng)過測試,不含DNases和RNases,保證了RNA樣本的完整性。純化后的蛋白質需要進行功能驗證,如酶活性測定、結合親和力測試等,以確保其具有預期的生物學功能。吉林人源膠原蛋白技術服務研發(fā)
為了實現(xiàn)目標蛋白的產(chǎn)量,需要對畢赤酵母表達系統(tǒng)中的甲醇和山梨醇濃度、Mut形式、溫度等改變。天津純化工藝服務技術服務開發(fā)
1stStrandcDNASynthesisKit(RNaseH-)withgDNAEraser是一種設計用于從RNA模板合成cDNA 鏈的試劑盒,它包含gDNAEraser以去除基因組DNA的污染,以及RNaseH-逆轉錄酶以減少RNA模板的降解。以下是該試劑盒的一些關鍵特點和應用:1.**去除基因組DNA污染**:試劑盒中的gDNAEraser能有效去除RNA模板中的基因組DNA污染,確保后續(xù)實驗結果的準確性。2.**RNaseH-逆轉錄酶**:該試劑盒使用的逆轉錄酶缺乏RNaseH活性,有助于保護RNA模板不被過早降解,從而可以合成更長的cDNA鏈。3.**高溫穩(wěn)定性**:逆轉錄酶經(jīng)過基因工程改造,具有較高的熱穩(wěn)定性,可以在高溫條件下(如50°C)進行cDNA 鏈的合成,有助于打開RNA的二級結構。4.**合成長鏈cDNA的能力**:能夠合成長達5kb甚至更長的cDNA片段,適合于需要合成全長或長片段cDNA的實驗。5.**包含所有必需組分**:試劑盒包含cDNA 鏈合成所需的所有試劑,如逆轉錄酶、RNase抑制劑、隨機引物、寡聚dT引物、dNTPs、緩沖液等。6.**適用于多種RNA模板**:可以用于從總RNA或mRNA模板合成cDNA 鏈,適用于實時熒光定量RT-qPCR、3'-和5'-RACE等實驗。天津純化工藝服務技術服務開發(fā)