2024-12-19 00:23:01
細(xì)胞培養(yǎng)常用水和平衡鹽溶液的配制方法:水是細(xì)胞賴以生存的主要環(huán)境,營養(yǎng)物質(zhì)和代謝產(chǎn)物都必須溶解在水中,才能為細(xì)胞吸收和排泄。而且,水溶液對維持細(xì)胞形態(tài)、進(jìn)行生物化學(xué)反應(yīng)、溫度傳導(dǎo)、調(diào)節(jié)滲透壓和酸堿度的平衡都有著重要作用。體外培養(yǎng)細(xì)胞對水的質(zhì)量很敏感,要求很高。水的純度不夠,即使混雜有一些含量極微的有害元素,有時也會對細(xì)胞產(chǎn)生不利的影響,甚至引起細(xì)胞中毒死亡。因此,配制培養(yǎng)液的水必須經(jīng)過純化。細(xì)胞培養(yǎng)實驗室需要純凈的水,常可分為離子交換水和蒸餾水兩種。前者由于仍然帶有非離子物質(zhì)和有機(jī)物,在組織培養(yǎng)中很少使用。組織培養(yǎng)必須使用玻璃蒸餾器制備的三次蒸餾水;二次蒸餾水或外購的金屬蒸餾器制的蒸餾水只能用于清洗器皿,蒸餾水的儲存對保持水的質(zhì)量有很大影響;周圍環(huán)境和空氣能使水污染或改變其pH,所以儲存水的容器要盡量減少啟開的次數(shù),避免和外界過多接觸,存放時間不宜太長,一般不要超過兩周,**好現(xiàn)制現(xiàn)用。二、平衡鹽溶液(balancedsaltsolution,BSS),主要由無機(jī)鹽和葡萄糖組成。BSS中的無機(jī)離子不僅是細(xì)胞生命所需成分,而且在維持滲透壓、緩沖和調(diào)節(jié)溶液的酸堿度方面,起著重要作用。 DPBS 與 PBS 的不同之處在于它還包括氯化鉀,并且提供多種配方。陜西EBSS平衡鹽溶液價目表
PBS緩沖液是實驗室中常用的緩沖液之一,不管是免疫組化實驗還是細(xì)胞培養(yǎng)實驗,都經(jīng)常會用到PBS緩沖液。以下是我整理的一些PBS緩沖液的配置方法。PBS緩沖液的配制:方法一:含0.05%吐溫-20的pH7.4的磷酸鹽緩沖液(簡稱為PBS-T)配制方法為:1.稱取磷酸二氫鉀(KH2PO4),磷酸氫二鈉(Na2HPO4·12H2O),氯化鈉(NaCl),氯化鉀(KCl),吐溫-20,加水;2.PBS:PhosphateBufferedSaline;3.PBS1L配方pH7.4:磷酸二氫鉀(KH2PO4):0.27g;4.磷酸氫二鈉(Na2HPO4):1.42g;5.氯化鈉(NaCl):8g;6.氯化鉀(KCl)0.2g;7.加去離子水約800mL充分?jǐn)嚢枞芙?,然后加入濃鹽酸調(diào)pH至7.4,***定容到1L;上海平衡鹽溶液哪家便宜生理鹽水并不能代替平衡鹽溶液磷酸鹽緩沖液使用。
在生物實驗中,選擇合適的緩沖劑對于維持實驗環(huán)境的穩(wěn)定性和實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性至關(guān)重要。在眾多緩沖劑中,HEPES和PBS是兩種***使用的生物緩沖劑。本文將對比分析HEPES和PBS這兩種緩沖劑的特點和適用場景,幫助您選擇適合您研究需求的緩沖劑。
一、HEPES緩沖劑特點HEPES是一種高pH緩沖劑,具有較好的熱穩(wěn)定性和化學(xué)穩(wěn)定性。它能夠提供穩(wěn)定的pH環(huán)境,適用于多種生物實驗。此外,HEPES還具有一定的抗氧化性能,能夠保護(hù)細(xì)胞免受活性氧的攻擊。使用場景HEPES適用于細(xì)胞培養(yǎng)、分子生物學(xué)實驗、電泳、光譜分析等生物實驗。特別是在細(xì)胞培養(yǎng)中,HEPES可以作為***使用的緩沖劑,提供穩(wěn)定的pH環(huán)境和適宜的離子濃度,促進(jìn)細(xì)胞的生長和分化。
(四)PBS液可配成含0.85%NaCl,pH7.2的PBS(簡稱pH7.2PBS)。1.PBS貯存液(10×)配法NaCl8.5gKCl0.2gNa2HP04·12H202.85g(或Na2HP04·2H201.13g)KH2P040.27g溶于100ml雙蒸水中。2.PBS應(yīng)用液配法取貯存液50ml加雙蒸水450m1即成,經(jīng)103kPa(121.3℃)15分鐘滅菌,置室溫或4℃保存?zhèn)溆?。除上述三種常用的平衡鹽溶液外,尚有其他幾種次常用的平衡鹽溶液,如低鈣鎂的Dul-becc。液和無鈣鎂的D-Hanks液(或CMF-Hanks)等??捎糜谂渲葡汉拖礈旒?xì)胞(可防止抑制酶活性和致細(xì)胞凝聚等)。其成分見表1-5,配制方法可參照上述幾種平衡鹽溶液的方法進(jìn)行。PBS并不一定是中性,而是有要求的,不同的用途pH值不同。
滲透壓平衡和水鹽平衡的定義??:滲透壓平衡是指溶液中溶質(zhì)微粒對水的吸引力達(dá)到動態(tài)平衡的狀態(tài)。水鹽平衡則是指人體內(nèi)水和氯化鈉等無機(jī)鹽的攝入量和排出量達(dá)到動態(tài)平衡,維持體內(nèi)含量相對恒定。?滲透壓平衡的機(jī)制和調(diào)節(jié)過程?滲透壓平衡是通過半透膜兩側(cè)的溶液濃度差異來實現(xiàn)的。當(dāng)溶液濃度較高時,水分子會從濃度較低的一側(cè)向濃度較高的一側(cè)移動,直到兩側(cè)的溶質(zhì)濃度達(dá)到均衡。這種移動是通過水分子通過半透膜的擴(kuò)散來實現(xiàn)的。在體內(nèi),血漿、細(xì)胞內(nèi)液和細(xì)胞外液之間的滲透壓需要保持平衡,以確保細(xì)胞的正常功能和體液的穩(wěn)定。?水鹽平衡的機(jī)制和調(diào)節(jié)過程?水鹽平衡是通過神經(jīng)-體液-內(nèi)分泌網(wǎng)絡(luò)的調(diào)節(jié)來實現(xiàn)的。下丘腦作為調(diào)節(jié)中樞,根據(jù)體內(nèi)的水和鹽分含量來調(diào)節(jié)抗******的分泌。當(dāng)體內(nèi)水分過多或鹽分過多時,抗******的分泌會減少,促進(jìn)尿液排出,以恢復(fù)水和鹽分的平衡。這種調(diào)節(jié)機(jī)制確保了體內(nèi)水和鹽分的動態(tài)平衡,維持了正常的生理功能。?總結(jié)兩者的區(qū)別?滲透壓平衡主要涉及溶液中溶質(zhì)微粒對水的吸引力達(dá)到動態(tài)平衡的狀態(tài),而水鹽平衡則是指人體內(nèi)水和氯化鈉等無機(jī)鹽的攝入量和排出量達(dá)到動態(tài)平衡,維持體內(nèi)含量相對恒定。滲透壓平衡主要發(fā)生在細(xì)胞內(nèi)外液之間。 平衡鹽溶液是集緩沖液的緩沖力、生理鹽水的等滲性以及培養(yǎng)液的營養(yǎng)供應(yīng)特點于一體的。上海平衡鹽溶液哪家便宜
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方法二:母液的配制:0.2MNa2HPO4:稱取71.6gNa2HPO4-12H2O,溶于1000ml水0.2MNaH2PO4:稱取2gNaH2PO4-2H2O,溶于1000ml水各種濃度PB(pH=7.4)的配制:先配0.2MPB(pH=7.4,100ml):取19ml0.2mol/L的NaH2PO4,81ml0.2mol/L的Na2HPO4,即可。然后只需將0.2MPB(pH=7.4)按相應(yīng)比例適當(dāng)稀釋即可,如:0.1MPB(PH=7.4):取500ml0.2MPB,加水稀釋至1000ml即可。如:0.01MPB(PH=7.4):取50ml0.2MPB,加水稀釋至1000ml即可。0.02MPB(PH=7.4):取100ml0.2MPB,加水稀釋至1000ml即可。若需要NaCl的話,加入NaCl至0.9%(g/100ml)即可。陜西EBSS平衡鹽溶液價目表