2025-01-05 02:03:00
組織切片是病理學(xué)診斷上面必要的過程,但你以為檢體只有做成石蠟包埋切片,然后染H&E染色后診斷一個方法嗎?其實在組織病理上還有很多不同的包埋及切片方法,配上各種原理不同的染色法,就可以進(jìn)行各式各樣的組織分析。***,我們整理了常用的組織病理學(xué)切片技術(shù)及染色方法,供大家對切片技術(shù)上有更多的認(rèn)識~因應(yīng)各種不同的診斷及實驗需求,選擇適合的染色,才能取得比較好的結(jié)果。????H&E:觀察組織「形態(tài)」的標(biāo)準(zhǔn)染色方法,是組織學(xué)中**重要、**常被使用的化學(xué)染色方法。????特殊化學(xué)染色:種類繁多,針對各種不同的組織細(xì)胞生化特性,有多種不同的染色可以應(yīng)用。天狼星紅染色在偏振光下可以區(qū)分不同類型的膠原纖維。南京抗酒石酸酸性磷酸酶染色公司
選擇合適的染色方法取決于實驗的具體目的和需要檢測的組織或細(xì)胞成分。以下是一些常見的實驗?zāi)康募捌湎鄳?yīng)的染色方法:1.觀察組織結(jié)構(gòu)和細(xì)胞形態(tài):?H&E染色(蘇木精-伊紅染色):適用于常規(guī)組織學(xué)和病理學(xué)檢查,能夠清晰區(qū)分細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì),顯示組織結(jié)構(gòu)和病變。2.檢測結(jié)締組織和纖維化:?Masson三色染色:用于區(qū)分肌肉、膠原纖維和細(xì)胞質(zhì),適合研究結(jié)締組織和纖維化病變。3.檢測糖原和多糖類物質(zhì):?PAS染色(過碘酸-Schiff反應(yīng)):用于檢測糖原、***和其他多糖類物質(zhì),常用于診斷糖原貯積病和******。南京油紅O染色 哪家好病理學(xué)家通過染色切片分析組織變化。
H&E染色可以清晰地顯示細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì),有助于識別炎癥、**等病變。免疫組織化學(xué)?原理:免疫組織化學(xué)是一種利用抗體來標(biāo)記和檢測特定蛋白質(zhì)、細(xì)胞或其他生物分子的方法。通過特異性抗體與目標(biāo)抗原結(jié)合,再用標(biāo)記物(如酶或熒光素)進(jìn)行顯色,從而在顯微鏡下可視化這些分子。?應(yīng)用:免疫組織化學(xué)可以幫助確定細(xì)胞內(nèi)或組織內(nèi)是否存在特定的生物標(biāo)志物,從而幫助診斷和研究疾病。例如,在**研究中,可以通過免疫組化檢測特定的**標(biāo)志物(如HER2、Ki-67等),以評估**的類型、分級和預(yù)后。?技術(shù)細(xì)節(jié):免疫組化實驗通常包括固定、脫蠟、抗原修復(fù)、一抗孵育、二抗孵育、顯色和封片等多個步驟。每個步驟都需要嚴(yán)格控制條件,以確保結(jié)果的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性。
切片染色室?免疫組化工作區(qū):這里配備了專門的設(shè)備和技術(shù),用于執(zhí)行免疫組化實驗。這些實驗利用抗體來標(biāo)記和檢測特定蛋白質(zhì)或其他生物分子,從而幫助確定細(xì)胞內(nèi)或組織內(nèi)的特定標(biāo)志物。?特殊染**:除了常規(guī)的HE染色外,實驗室還能夠進(jìn)行各種特殊的化學(xué)染色,如Masson三色染色、PAS染色等。這些染色方法可以更精確地顯示組織的不同成分和結(jié)構(gòu)。?封片區(qū):染色后的切片需要經(jīng)過封片處理,以保護(hù)染色效果并便于長期保存。封片過程中使用的封片劑能夠有效地防止染料脫落。特殊染色技術(shù)用于檢測特定細(xì)胞成分。
病理實驗外包常見染色介紹:天狼星紅染色(Sirius Red Staining)天狼星紅染色是一種廣泛應(yīng)用于組織學(xué)研究中的染色方法,特別適用于顯示膠原纖維的分布和結(jié)構(gòu)。該染色技術(shù)利用了天狼星紅染料對膠原纖維的高度親和力,在偏振光下可以觀察到不同類型的膠原纖維呈現(xiàn)出不同的顏色。染色原理:?染料特性:天狼星紅是一種陽離子染料,它能夠與膠原纖維中的負(fù)電荷基團(tuán)結(jié)合,從而產(chǎn)生強(qiáng)烈的紅色染色效果。?偏振光下的表現(xiàn):在偏振光顯微鏡下,I型膠原纖維呈現(xiàn)亮黃色或橙紅色,而III型膠原纖維則呈現(xiàn)綠色或黃色。這種顏色差異使得天狼星紅染色成為區(qū)分不同類型膠原纖維的有效手段。?其他成分:除了膠原纖維外,細(xì)胞核通常被染成藍(lán)黑色或淡藍(lán)色,而肌肉和其他非膠原組織則保持無色或淡粉色。應(yīng)用范圍:?心肌梗死模型:天狼星紅染色可以用于檢測心肌梗死后的心臟組織中膠原纖維的沉積情況,評估心肌修復(fù)和纖維化的程度。?肺纖維化:通過天狼星紅染色,研究人員可以定量分析肺組織中的膠原纖維含量,評估肺纖維化的嚴(yán)重程度。?肝纖維化:在肝臟疾病的研究中,天狼星紅染色常用來顯示肝組織中的膠原纖維沉積,幫助診斷和評估肝纖維化的進(jìn)展。染色切片在醫(yī)學(xué)研究中具有重要作用。南京TTC染色結(jié)果分析
Alcian藍(lán)染色用于檢測酸性粘液物質(zhì)。南京抗酒石酸酸性磷酸酶染色公司
TUNEL染色的染色步驟1. 樣品準(zhǔn)備:?將組織切片或細(xì)胞固定在載玻片上,通常使用4%多聚甲醛或其他固定劑。?進(jìn)行蛋白酶K處理,以增加細(xì)胞膜的通透性,使TdT能夠進(jìn)入細(xì)胞并接觸DNA。2. TUNEL反應(yīng):?準(zhǔn)備TUNEL反應(yīng)混合液,包括TdT酶和標(biāo)記的dUTP(如熒光素或生物素標(biāo)記的dUTP)。?將反應(yīng)混合液滴加到樣品上,在適當(dāng)?shù)臏囟认路跤欢〞r間(通常為1小時左右)。3. 洗滌:?用PBS緩沖液或其他適當(dāng)?shù)南礈煲呵逑礃悠?,去除未結(jié)合的dUTP。4. 信號檢測:?如果使用的是熒光素標(biāo)記的dUTP,可以直接在熒光顯微鏡下觀察。?如果使用的是生物素標(biāo)記的dUTP,則需要進(jìn)一步與鏈霉親和素-熒光素復(fù)合物或其他顯色試劑結(jié)合,然后在顯微鏡下觀察。南京抗酒石酸酸性磷酸酶染色公司