2024-12-17 06:09:21
二代測序——基因組測序該測幾個G?②
人類全外顯子組測序
人類全外顯子組*占基因組的1%-2%,大小約為30M-60M左右,但通常需要較高的測序深度來確保外顯子區(qū)域的變異檢測準確性,一般測序深度在100X-200X之間,數(shù)據(jù)量大約在3G-12G左右。全外顯子組測序主要關(guān)注編碼蛋白質(zhì)的外顯子區(qū)域,能夠高效地檢測出與疾病相關(guān)的基因突變,常用于遺傳病的診斷、**基因突變篩查等研究。
動植物基因組測序
常見動植物:對于一些常見的動植物物種,如水稻、小鼠等,其基因組大小與人類基因組相近或更小。全基因組測序時,測序深度一般在10X-30X左右,數(shù)據(jù)量在30G-90G之間。如果是進行重測序或特定性狀相關(guān)的研究,測序深度可根據(jù)具體情況適當調(diào)整。
復雜基因組的動植物:部分動植物的基因組較大且復雜,例如某些魚類、植物的多倍體物種等,其基因組大小可能達到數(shù)G甚至數(shù)十G。對于這類物種的全基因組測序,測序深度可能在5X-10X左右,數(shù)據(jù)量也會因基因組大小而異,從幾十G到數(shù)百G不等。 二代測序又可以稱之為什么?蘇州二代測序公司
④二代測序一般多久出結(jié)果?
4、數(shù)據(jù)分析的復雜程度
數(shù)據(jù)分析是二代測序的重要環(huán)節(jié)。簡單的分析,如檢測已知的單核苷酸多態(tài)性(SNP),可以通過與參考基因組比對后利用一些成熟的軟件快速完成。但如果是進行復雜的分析,如尋找新的基因融合事件、復雜結(jié)構(gòu)變異的檢測或者進行從頭組裝(denovoassembly),則需要更復雜的算法和更多的計算資源,花費的時間可能從數(shù)天到數(shù)周。例如,對于常規(guī)的SNP檢測和注釋,數(shù)據(jù)分析可能在1-3天內(nèi)完成;而對于**樣本中復雜的基因融合分析,可能需要3-7天甚至更長時間來確保結(jié)果的準確性。 浙江哪里有二代測序分析NGS測序是二代測序嗎?
什么樣本可以做二代測序?④
4、口腔樣本
口腔拭子:通過刮取口腔黏膜細胞來獲取樣本??谇皇米硬杉奖恪o創(chuàng),可用于DNA提取和基因檢測。例如,在法醫(yī)鑒定中,口腔拭子是常用的樣本來源,用于個體身份識別和親子關(guān)系鑒定等;在一些大規(guī)模的人群基因篩查項目中,也可以使用口腔拭子來收集樣本。
5、糞便樣本
糞便中含有腸道微生物、腸道上皮細胞等成分。對糞便樣本進行宏基因組測序,可以研究腸道微生物群落的組成、功能和多樣性。例如,在腸道疾?。ㄈ缪装Y性腸病、結(jié)直腸*等)的研究中,分析糞便中微生物群落結(jié)構(gòu)的變化,以及微生物基因的表達情況,有助于了解疾病的發(fā)病機制和尋找潛在的生物標志物。
二代測序技術(shù)在不同人群中的準確性有何差異③
孕婦及胎兒
優(yōu)勢:無創(chuàng)產(chǎn)前篩查(NIPT)是二代測序技術(shù)用于孕期胎兒常見染色體非整倍體篩查的應用,對于唐氏綜合征、18-三體綜合征、13-三體綜合征等染色體異常疾病的檢測準確率分別能達到95%、85%、75%以上,明顯高于傳統(tǒng)血清學篩查。
局限性:孕婦外周血中胎兒游離DNA來源于胎盤滋養(yǎng)細胞,可能與胎兒實際情況不一致,導致假陽性。母親若合并免疫疾病、凝血功能障礙等,會使外周血中游離DNA含量過高,掩蓋胎兒來源的游離DNA,造成假陰性510. 一代、二代、三代測序的區(qū)別是什么?
二代測序不同應用場景下的速度有多快?
病原微生物檢測:一般來說,二代測序用于檢測病原微生物時,能夠在幾個小時到一天左右出結(jié)果。比如在快速檢測血液中的病原微生物時,通常可以在幾個小時內(nèi)獲得檢測結(jié)果,相比傳統(tǒng)的血液培養(yǎng)方法,時間大幅縮短,傳統(tǒng)血液培養(yǎng)一般需要幾天到一周的時間 。
全基因組測序:如果是對人類全基因組進行測序,以目前的技術(shù)水平,使用二代測序技術(shù)完成一個人的全基因組測序,一般需要 1-2 天左右的時間。而在十幾年前,人類全基因組測序計劃***完成時,耗費了大量的時間和精力,相比之下二代測序技術(shù)的速度提升***。
轉(zhuǎn)錄組測序:轉(zhuǎn)錄組測序的時間相對較短,一般幾個小時內(nèi)可以完成對大量 RNA 分子的測序和初步數(shù)據(jù)分析,進而快速了解基因在特定條件下的表達情況8. 二代測序需要分析嗎?上海嘉安健達二代測序價格
二代和三代測序的區(qū)別?蘇州二代測序公司
二代測序的建庫步驟①
一、樣本準備
樣本采集:根據(jù)研究目的采**適的樣本,如血液、組織、細胞等。例如,在**研究中,可能會采集**組織和對應的正常組織。對于血液樣本,一般采用靜脈穿刺采集外周血,收集在含有抗凝劑(如EDTA)的**管中,以防止血液凝固。組織樣本則需要在合適的條件下盡快處理,以保持核酸的完整性。如果是新鮮組織,可將其置于液氮中速凍,然后保存在-80℃冰箱中。
核酸提?。簭臉颖局刑崛「哔|(zhì)量的DNA或RNA。對于DNA提取,常用的方法有酚-氯仿抽提法和商業(yè)化的DNA提取試劑盒。酚-氯仿抽提法是利用酚和氯仿使蛋白質(zhì)變性,離心后使DNA處于水相,從而實現(xiàn)分離。試劑盒則是基于吸附柱的原理,DNA在特定的緩沖液條件下吸附在硅膠膜上,經(jīng)過洗滌和洗脫步驟得到純凈的DNA。RNA提取過程中,需要特別注意防止RNA酶的污染,因為RNA酶***存在且很穩(wěn)定,容易降解RNA。一般會使用含有RNA酶抑制劑的試劑,如焦碳酸二乙酯(DEPC)處理水來配制試劑,并且操作過程要在無RNA酶的環(huán)境中進行,如使用無RNA酶的***頭和離心管。常用的RNA提取方法是Trizol法,Trizol試劑可以同時破碎細胞并使RNA與蛋白質(zhì)和DNA分離,然后通過氯仿抽提、異丙醇沉淀等步驟得到RNA。 蘇州二代測序公司
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